ISOLAMENTO DI GLOBULI BIANCHI UMANI E VALUTAZIONE DELLE ACQUAPORINE AQP3 E AQP9 COME BIOMARCATORI PROGNOSTICI DELLA SEPSI

La sepsi è una sindrome clinica complessa caratterizzata da una iper-infiammazione a seguito di risposta immunitaria aberrante. L’elevata morbilità e mortalità a livello globale richiede l’identificazione di nuovi biomarcatori affidabili per la diagnosi, la stratificazione dei pazienti e l’efficacia degli interventi terapeutici. La ricerca di nuovi biomarker si è focalizzata, in questo lavoro, su proteine espresse dai leucociti periferici, facilmente campionabili e isolabili con tecniche all’avanguardia nel campo biomedico. Al centro dell’approccio sperimentale vi è l’impiego di tecniche avanzate di isolamento cellulare, i sistemi di separazione magnetica SepMate™ e EasySep™, che consentono un frazionamento efficiente, rapido e riproducibile di PBMCs (Peripheral Blood Mononuclear Cells) e di granulociti neutrofili, rispettivamente. Queste metodologie sfruttano principi di etichettatura immuno-magnetica o centrifugazione su gradiente di densità per massimizzare purezza e vitalità delle cellule target, minimizzando i tempi di lavorazione e la variabilità operatore. A seguito dell’isolamento, è stata eseguita l’estrazione di RNA totale e la quantificazione mediante PCR quantitativa dell’espressione genica di due Acquaporine (AQP), AQP3 e AQP9, come possibili biomarcatori, essendo coinvolte in numerosi processi infiammatori e immunitari. I risultati mostrano un’espressione differenziale tra PBMCs e neutrofili, evidenziando il potenziale ruolo di queste acquaporine nella modulazione della risposta immunitaria durante processi infiammatori sistemici. L’integrazione di tecnologie cellulari all’avanguardia con analisi molecolari fornisce una piattaforma solida per la scoperta di biomarcatori. I dati ottenuti supportano la candidatura di AQP3 e AQP9 come nuovi biomarcatori cellulari nella sepsi e aprono la strada a studi traslazionali volti a migliorare la diagnosi clinica e le strategie terapeutiche.